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微藻培養液
培養微藻之培養液配方有很多,最常使用的有f/2( Table 3.5)、Walne(韋因)(Table 3.6)、K(Table 3.8)、綠色藻肥料( Table 3.9)、褐色藻肥料(Table 3.10)及骨藻培養用肥料( Table 3.11)。微青海洋
Table 3.5 f/2 培養液配方
貯備液I | NaNO3 | 75 | g |
NaH2PO4·H2O | 5 | g | |
Na2SiO3·9H2O | 30 | g | |
蒸餾水到 | 1000ml | ||
貯備液II f/2 Trace Metal Solution: |
FeCl3·6H2O | 3.15 | g |
Na2EDTA·2H2O | 4.36 | g | |
CuSO4·5H2O (9.8 g/L dH2O) | 1.0 ml | ||
a2MoO4·2H2O (6.3 g/L dH2O) | 1.0 ml | ||
ZnSO4·7H2O (22.0 g/L dH2O) | 1.0 ml | ||
CoCl2·6H2O (10.0 g/L dH2O) | 1.0 ml | ||
MnCl2·4H2O (180.0 g/L dH2O) | 1.0 ml | ||
蒸餾水到 | 1000ml | ||
貯備液III f/2 Vitamin Solution |
蒸餾水到 | 1000 | ml |
Vitamin B12 (1.0 g/L dH2O) | 1.0 | ml | |
Biotin (0.1 g/L dH2O) | 10.0 | ml | |
Vitamin B1 | 200 | mg | |
使用時 | 海水 | 1000 | ml |
貯備液I | 1 | ml | |
貯備液II | 1 | ml | |
貯備液III | 0.5 | ml |
Table 3.6 Walne培養液配方(Walne, 1974)
貯備液I | NaNO3 | 100.00 | |
NaH2PO4‧2H2O | 20.00 | g | |
Na2EDTA | 45.00 | g | |
H3BO3 | 33.60 | g | |
MnCl2‧4H2O | 0.36 | ||
FeCl3‧6H2O | 1.30 | g | |
貯備液II | 1 | g | |
蒸餾水到 | 1,000 | ml | |
貯備液II | 蒸餾水到 |
1,00 |
ml |
ZnSO4‧7H2O | 4.4 | g | |
CoCl2‧6H2O | 2.0 | g | |
(NH4)6Mo7O24‧4H2O | 0.9 | g | |
CuSO4‧5H2O | 2.0 | g | |
貯備液III | 蒸餾水到 | 100 | ml |
維生素B12 | 10 | mg | |
維生素B1 | 200 | mg | |
貯備液IV | 蒸餾水到 | 100 | ml |
Na2SiO3 | 6.589 | g | |
使用時 | 海水 | 1,000 | ml |
貯備液I | 1 | ml | |
貯備液III | 0.1 | ml | |
貯備液IV* | 1 | ml | |
*只用於矽藻培養 |
Table 3.7 K培養液配方(Keller et al., 1987)
每公升加入量 | ||
NaNO3 | 75.0 | mg |
β-Na2‧glycero‧PO4 | 3.061 | mg |
Na2SiO3‧9H2O* | 15.0 | mg |
維生素 | ||
B1(Thiamine) | 100 | μg |
H(Biotin) | 0.5 | μg |
B12(Cyanocobalamin) | 0.5 | μg |
微量金屬 | ||
FeEDTA | 4.295 | mg |
MnCl2‧4H2O | 0.18 | mg |
ZnSO4‧7H2O | 0.022 | mg |
CoCl2‧6H2O | 0.010 | mg |
Na2MoO4‧2H2O | 0.006 | mg |
CuSO4‧5H2O | 0.0025 | mg |
EDTA(Na2) | 37.22 | mg |
TRIS(pH7) | 121.1 | mg |
NH4Cl | 2.675 | mg |
Na2SeO3 | 0.00173 | mg |
*只用於矽藻培養 |
Table 3.8 GPM培養液配方(Loeblich, 1975)微青海洋
每公升加入量 | ||
KNO3 | 202 | mg |
K2HPO4 | 35 | mg |
維生素 | ||
B1(Thiamine) | 1011 | μg |
H(Biotin) | 2 | μg |
B12(Cyanocobalamin) | 1 | μg |
微量金屬 | ||
Na2EDTA | 48.4 | mg |
FeCl3‧6H2O | 1.45 | mg |
MnCl2‧4H2O | 4.31 | mg |
ZnCl2 | 0.312 | mg |
CoCl2‧6H2O | 0.22 | mg |
H3BO3 | 34.19 | mg |
土壤抽出液 | 15 | ml |
Table 3.9 綠色藻培養用肥料配方
硫酸銨 | 60~80 | 公克/噸水 |
尿素 | 30 | 公克/噸水 |
過磷酸鈣 | 30 | 公克/噸水 |
Table 3.10 褐色藻培養用肥料配方
尿素 | 30 | 公克/噸水 |
過磷酸鈣 | 30 | 公克/噸水 |
氯化鐵 | 2.7 | 公克/噸水 |
Table 3.11 骨藻培養用肥料(公克/噸水)(Liao et al., 1991)
使用例 | |||||
肥料種類 | I | II | III | IV | V |
硝酸鉀 | 2 | 50-100 | |||
尿素 | 20 | 30 | 12 | 4 | |
硫酸銨 | 20 | 4 | 4 | ||
磷酸氫二鈉 | 3 | 10 | |||
過磷酸鈣 | 15 | 4 | 4 | ||
氯化鉀 | 15 | 4 | 2 | ||
矽酸鈉 | 2-5 | ||||
硫酸亞鐵 | 0.25 | ||||
氯化鐵 | 0.25 | ||||
Na2EDTA | 5-10 |
- 韋音配方可用來培養大多數種類,為東港分所種原庫使用保種之配方。微青海洋
- f/2配方為美國國家海洋微藻收集中心使用之基本配方,K為其衍生配方,在Sigma藥品目錄上可找到,有配好的濃縮液販售。
- GPM配方為澳洲CSIRO微藻收集中心,除f/2外常用之配方。
- 綠藻肥料為綠色藻類及真正眼點藻類保種及大量培養用。
- 褐色藻肥料則用於大量培養呈褐色之藻類。
- 骨藻培養用肥料則為臺灣草蝦苗業者用於培養骨藻之各種配方。微青海洋
製配培養液時,先將海水經GF/C 濾紙過濾後,以高壓滅菌釜滅菌,冷卻後,每公升加入各種營養鹽濃縮液1ml或0.1ml,配成所需的培養液。
為便於操作及稱取各種營養鹽,通常均配成濃縮液。將需求量較高之巨量營養鹽、氮、磷、矽,分別以去離子水配成1,000倍濃縮液,鐵鹽也單獨配成一瓶;其餘微量金屬與EDTA(螯合劑)配成金屬混合液。首先將各金屬鹽以去離子水分別溶解後,逐一加入攪拌混合,再加去離子水至定量,先配成100或1,000倍第一濃縮液,再稀釋成1,000倍工作用濃縮液。微青海洋
維生素先分別配成100或1,000倍第一濃縮液;再混合配成1,000倍工作用濃縮液。除維生素以殺菌去離子水配製並經微細濾過處理外,各種營養鹽均經 高壓滅菌釜滅菌,均貯於冰箱備用。
保種使用全部營養鹽,大量培養僅用氮、磷、矽、鐵等主要營養素。微青海洋
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