微青海洋

微藻培養液

培養微藻之培養液配方有很多，最常使用的有f/2（ Table 3.5）、Walne（韋因）（Table 3.6）、K（Table 3.8）、綠色藻肥料（ Table 3.9）、褐色藻肥料（Table 3.10）及骨藻培養用肥料（ Table 3.11）。微青海洋

 

Table 3.5 f/2 培養液配方

貯備液I	NaNO3	75	g
	NaH2PO4·H2O	5	g
	Na2SiO3·9H2O	30	g
	蒸餾水到	1000ml
貯備液II f/2 Trace Metal Solution:	FeCl3·6H2O	3.15	g
	Na2EDTA·2H2O	4.36	g
	CuSO4·5H2O (9.8 g/L dH2O)	1.0 ml
	a2MoO4·2H2O (6.3 g/L dH2O)	1.0 ml
	ZnSO4·7H2O (22.0 g/L dH2O)	1.0 ml
	CoCl2·6H2O (10.0 g/L dH2O)	1.0 ml
	MnCl2·4H2O (180.0 g/L dH2O)	1.0 ml
	蒸餾水到	1000ml
貯備液III f/2 Vitamin Solution	蒸餾水到	1000	ml
	Vitamin B12 (1.0 g/L dH2O)	1.0	ml
	Biotin (0.1 g/L dH2O)	10.0	ml
	Vitamin B1	200	mg
使用時	海水	1000	ml
	貯備液I	1	ml
	貯備液II	1	ml
	貯備液III	0.5	ml

Table 3.6 Walne培養液配方（Walne, 1974）

貯備液I	NaNO3	100.00
	NaH2PO4‧2H2O	20.00	g
	Na2EDTA	45.00	g
	H3BO3	33.60	g
	MnCl2‧4H2O	0.36
	FeCl3‧6H2O	1.30	g
	貯備液II	1	g
	蒸餾水到	1,000	ml
貯備液II	蒸餾水到	1,00	ml
	ZnSO4‧7H2O	4.4	g
	CoCl2‧6H2O	2.0	g
	（NH4）6Mo7O24‧4H2O	0.9	g
	CuSO4‧5H2O	2.0	g
貯備液III	蒸餾水到	100	ml
	維生素B12	10	mg
	維生素B1	200	mg
貯備液IV	蒸餾水到	100	ml
	Na2SiO3	6.589	g
使用時	海水	1,000	ml
	貯備液I	1	ml
	貯備液III	0.1	ml
	貯備液IV*	1	ml
*只用於矽藻培養

 

Table 3.7 K培養液配方（Keller et al., 1987）

	每公升加入量
NaNO3	75.0	mg
β-Na2‧glycero‧PO4	3.061	mg
Na2SiO3‧9H2O*	15.0	mg
維生素
B1（Thiamine）	100	μg
H（Biotin）	0.5	μg
B12（Cyanocobalamin）	0.5	μg
微量金屬
FeEDTA	4.295	mg
MnCl2‧4H2O	0.18	mg
ZnSO4‧7H2O	0.022	mg
CoCl2‧6H2O	0.010	mg
Na2MoO4‧2H2O	0.006	mg
CuSO4‧5H2O	0.0025	mg
EDTA（Na2）	37.22	mg
TRIS（pH7）	121.1	mg
NH4Cl	2.675	mg
Na2SeO3	0.00173	mg
*只用於矽藻培養

 

 

Table 3.8 GPM培養液配方（Loeblich, 1975）微青海洋

	每公升加入量
KNO3	202	mg
K2HPO4	35	mg
維生素
B1（Thiamine）	1011	μg
H（Biotin）	2	μg
B12（Cyanocobalamin）	1	μg
微量金屬
Na2EDTA	48.4	mg
FeCl3‧6H2O	1.45	mg
MnCl2‧4H2O	4.31	mg
ZnCl2	0.312	mg
CoCl2‧6H2O	0.22	mg
H3BO3	34.19	mg
土壤抽出液	15	ml

 

Table 3.9 綠色藻培養用肥料配方

硫酸銨	60～80	公克/噸水
尿素	30	公克/噸水
過磷酸鈣	30	公克/噸水

 

Table 3.10 褐色藻培養用肥料配方

尿素	30	公克/噸水
過磷酸鈣	30	公克/噸水
氯化鐵	2.7	公克/噸水

 

Table 3.11 骨藻培養用肥料（公克/噸水）（Liao et al., 1991）

	使用例
肥料種類	I	II	III	IV	V
硝酸鉀	2	50-100
尿素	20		30	12	4
硫酸銨			20	4	4
磷酸氫二鈉	3	10
過磷酸鈣			15	4	4
氯化鉀			15	4	2
矽酸鈉		2-5
硫酸亞鐵				0.25
氯化鐵		0.25
Na2EDTA				5-10

• 韋音配方可用來培養大多數種類，為東港分所種原庫使用保種之配方。微青海洋
  
  
• f/2配方為美國國家海洋微藻收集中心使用之基本配方，K為其衍生配方，在Sigma藥品目錄上可找到，有配好的濃縮液販售。
• GPM配方為澳洲CSIRO微藻收集中心，除f/2外常用之配方。
• 綠藻肥料為綠色藻類及真正眼點藻類保種及大量培養用。
• 褐色藻肥料則用於大量培養呈褐色之藻類。
• 骨藻培養用肥料則為臺灣草蝦苗業者用於培養骨藻之各種配方。微青海洋

製配培養液時，先將海水經GF/C 濾紙過濾後，以高壓滅菌釜滅菌，冷卻後，每公升加入各種營養鹽濃縮液1ml或0.1ml，配成所需的培養液。

為便於操作及稱取各種營養鹽，通常均配成濃縮液。將需求量較高之巨量營養鹽、氮、磷、矽，分別以去離子水配成1,000倍濃縮液，鐵鹽也單獨配成一瓶；其餘微量金屬與EDTA（螯合劑）配成金屬混合液。首先將各金屬鹽以去離子水分別溶解後，逐一加入攪拌混合，再加去離子水至定量，先配成100或1,000倍第一濃縮液，再稀釋成1,000倍工作用濃縮液。微青海洋

維生素先分別配成100或1,000倍第一濃縮液；再混合配成1,000倍工作用濃縮液。除維生素以殺菌去離子水配製並經微細濾過處理外，各種營養鹽均經 高壓滅菌釜滅菌，均貯於冰箱備用。

保種使用全部營養鹽，大量培養僅用氮、磷、矽、鐵等主要營養素。微青海洋